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      流式细胞术

      FCCIC为所有仪器的分析流式细胞术提供辅助使用服务(按小时收费),包括BD LSR Fortessa、BD FACSAria™Fusion SORP和BD FACSAria™Fusion。辅助细胞分类也可在BD FACSAria™Fusion SORP和BD FACSAria™Fusion上获得。所有仪器均可接受培训和独立使用(折扣)。仪器培训是强制性的任何FCCIC用户谁将执行无辅助流式细胞分析或分类。服务费用各不相同,收费表可在iLab连同我们的服务申请表格。请联系帕姆惠特尼(pjwhitney@mdanderson.org)之前安排初步服务

      服务和应用程序

      分析流式细胞术

      流式细胞术是细胞生物学研究中广泛使用的基础工具。乐动体育LDsports中国蛋白表达或细胞状态的特定指标可以同时测量单个细胞在更大的,异质性群体。该核心提供了先进仪器和专家人员的访问,以满足大多数任何研究人员的需要。乐动体育LDsports中国该中心专门使用BD LSR Fortessa 15参数细胞分析仪开发复杂的检测方法,定量检测细胞表面和细胞质抗原、细胞周期、细胞凋亡、“侧群”和荧光转基因表达(如GFP、YFP、RFP和BFP)。除了这个关键乐器,我们的FACSAriaTM仪器也可用于更多的常规流量分析应用。

      细胞分类

      FCCIC的细胞分选设备包括一个BD FACSAria™Fusion, 17参数,高速细胞分选机,用于在生物安全柜内处理≥BSL2样品,和一个BD FACSAria™SORP, 18参数,高速细胞分选机。该核心可以根据基于抗体的染色、荧光蛋白表达和活力指标的许多不同组合,分离出各种不同的细胞类型。使用BD FACSDiva™软件检测细胞,可以从单个异质样品中同时收集到1-4个试管中。

      最新的软件版本允许索引排序,让研究人员确定从他们的实验参数定义的种群中收集的单细胞的来源。乐动体育LDsports中国自动细胞分配装置可以将单个细胞分配到96孔或384孔板中。样品室和收集装置是气候控制和气溶胶包含。

      该核心还运营着一个默天旎的autoMACS Pro细胞分离器,这是一种免疫磁细胞分离系统,可用于富集或耗尽细胞群,然后在我们的BD仪器上进行分选。

      精母细胞分类

      小鼠精母细胞减数分裂按减数分裂阶段进行分类。所示的已分类种群的显微照片(虚线环绕种群并与图像相连)证实了减数分裂阶段。

      其他服务

      • 对所有仪器进行多参数分析和分类
      • autoMACSpro可用于流式实验前细胞群的耗尽/富集
      • 激光配置允许荧光蛋白的全光谱分析,核心人员常规使用10-12种颜色进行实验
      • 分类成各种管和板
      • 指数排序
      • 实验设计指导
      • 对独立用户进行仪器培训
      • 培训应用和使用FlowJo分析软件

      培训

      Flow Core建议首次用户联系Pam Whitney (pjwhitney@mdanderson.org),在确定任何实验计划之前安排一次咨询。这次磋商将提供关于最佳实验方法、最理想的荧光板和具体分析方法的设计方面的意见,以确保恢复有意义的数据以及用户的期望和项目范围内的服务成本。

      Core建议用户至少在服务日期前一周安排预约。提前计划可以让研究人员在他们选择的仪器上有更多的时间选择。乐动体育LDsports中国

      对于任何想要进行无辅助流式细胞术分析或分类的Flow Core用户,必须进行仪器培训。培训由Pam Whitney (pjwhitney@mdanderson.org)提供,并将包含多个天数的时间块。完成培训后,颁发结业证书。

      核心人员还可以使用FlowJo软件协助进行数据分析,或者在时间允许的情况下,为特定项目进行分析,但需要支付额外费用。

      请注意,每个用户都有责任归档自己的数据。核心人员可以帮助用户学习这种做法。

      仪表

      BD FACSAria™SORP融合

      BD FACSAria™Fusion SORP是一个18参数,高速细胞分选机,由核心人员运行。该仪器为研究人员提供了分离和捕获活细胞亚群或单细胞乐动体育LDsports中国的能力,用于分子、遗传和/或功能分析。除了荧光抗体的制备外,该5激光仪器还可以区分许多荧光蛋白、干细胞和侧群。细胞由数字BD FACSDiva™软件检测,并从单个样品中同时收集到一个或多达四个管中。该仪器上的自动细胞分配装置能够将单个细胞分配到96孔或384孔板上。样品室和收集设备是气候控制和气溶胶包含。

      BD FACSAria™融合

      BD FACSAria™Fusion是一款16参数高速细胞分选机。它是主要的流量岩心仪器,由岩心人员操作。它为研究人员提供了分离和乐动体育LDsports中国捕获活细胞亚群或单个细胞的能力,用于分子、遗传和/或功能分析。该仪器为最佳的多色分析和细胞分选提供了卓越的灵敏度和分辨率。它的4激光允许用户区分许多荧光蛋白,荧光抗体制剂,和其他标记物,以确定干细胞和侧种群。细胞由数字BD FACSDiva™软件检测,并同时收集到一个或多达四个试管中。自动细胞分配装置将单个细胞沉积到96或384孔板中。增强的流稳定性提高了分选的纯度和效率,以帮助分离细胞的小亚群(如干细胞),用于后续的体外和体内实验。该仪器包含在生物安全柜中,允许分析人体标本,同时确保用户的保护。

      BD LSRFortessa™

      BD LSRFortessa™是一款15参数细胞分析仪。这是一个4激光仪器配备数字BD FACSDiva™软件。该仪器提供的功能包括基于细胞表面或细胞内抗原表达的细胞亚群的定量,细胞凋亡和细胞周期参数的分析,以及多参数分析。该核心为研究人员提供BD LSR乐动体育LDsports中国Fortessa™无辅助操作的个性化培训。

      Miltenyi autoMACS®Pro分离器

      Miltenyi公司的autoMACS®Pro分离器是一种自动高速免疫磁细胞分离系统,能够一次处理多个样品。来自多个物种和组织类型的许多细胞类型,包括全血,都可以使用使用免疫磁珠的autoMACS®Pro处理。细胞可以通过积极选择、耗尽或未接触的隔离程序分离。它每秒可以从多达4×109的总细胞样本中对超过1000万个细胞进行排序。该仪器有一个触摸屏和易于导航的菜单。该系统减少了样品的手工处理,增加了重现性

      链接和资源

      样品制备

      样品

      • 所有样品的浓度应为5.0 × 106细胞/ml,在12 × 75 FACS管或15 ml锥形管中适当的缓冲液中,具体取决于仪器。
      • 带额外的缓冲液到核心以调整浓度。
      • 在仪器上运行之前,所有的样品都必须经过过滤。

      控制

      • 每个实验都必须有适当的控制。数据样本的生物对照可以包括抗体染色的同型对照或染色正常循环细胞进行细胞周期分析。
      • 仪器设置需要额外的控制:未染色细胞和单染色颜色控制。
      • 有关您的实验要求的更多信息,请联系FCCIC。

      光谱的观众

      BD荧光光谱观察器

      生命科技荧光光谱查看器

      流式细胞术教育

      BD生物科学电子学习课程

      介绍流式细胞术

      组织培养

      细胞培养的有用数字

      Gibco®细胞培养基础

      识别和纠正常见细胞生长问题的康宁指南

      给现在

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